酶解猪动脉血管制备弹力蛋白肽工艺

弹力蛋白是一种结构巨大、高交叉度、复杂的、疏水性、水不溶性的蛋白，作为一种主要的细胞外基质蛋白，组成了弹性纤维的“芯”。现已发现弹力蛋白有两种形式：弹力蛋白I存在于韧带、主动脉和皮肤中，弹力蛋白II可从软骨中得到。弹力蛋白是肌肤组成的重要成分，在肌肤中仅含5%，却是激发肌肤胶原蛋白和弹性纤维生成的关键，胶原蛋白决定肌肤的柔润饱满，弹性纤维决定肌肤的紧致弹力。弹力蛋白肽是弹力蛋白的降解产物。弹力蛋白的降解包括生物酶的降解和化学降解，前者一般称为弹力蛋白溶解，后者称为弹力蛋白肽的合成。弹力蛋白肽对纤维母细胞和单核细胞产生趋化作用，使弹性纤维与纤维母细胞的黏附力增强， 弹力蛋白肽可刺激Neu-1唾液酸酶的活性增强，Neu-1的活性增强可引起可溶性的弹力蛋白地释放，这些弹力蛋白聚集成团，或和微纤维成分相互作用，形成弹性纤维，因而可提高皮肤的弹力，对于预防、改善皱纹或松弛十分有效。猪动脉血管来源丰富、廉价易得，含有丰富的弹力蛋白I，是获得弹力蛋白肽的优质且性价比较高的原料，但是现有技术中未见通过酶解反应方法以猪动脉血管为原料制备弹力蛋白肽的报道。目前制备弹力蛋白肽分为三种方法：化学方法、重组DNA合成、酶解弹力蛋白。通过化学方法合成的弹力蛋白肽成本一般较高，并且其副产物可能对人体有害，同时生产过程中会产生污染环境的排出物；通过重组DNA合成的弹力蛋白肽普遍为长肽，而弹力蛋白肽一般都是短肽，因此这种方法不适合制备弹力蛋白肽；酶解弹力蛋白制备弹力蛋白肽时，不仅降解所耗的时间短、操作简单安全、产品营养流失较少，而且不污染环境。酶解反应在常规水浴中进行时，需要较长的反应时间；在酸、碱及有机溶剂等介质中进行时，易使酶蛋白变性失活，酶解效率降低。超声辅助酶解，由于热效应、机械效应、空化效应和化学效应等共同作用，细胞壁会产生位移和变形，出现纵向裂纹、吸水润胀、细纤维化等现象，这些物理变化能让酶在水解时，有效地提高其可及度，提高酶解效率。红外线辅助酶解，对反应体系进行升温并促进蛋白酶切位点的暴露，可有效增加酶切位点与酶的作用频率，从而提升酶解效率，继而显著提高蛋白水解度和肽的转化率。

华炬新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项酶解猪动脉血管制备弹力蛋白肽工艺，该技术的有益效果：1）以来源丰富、廉价易得、含丰富弹力蛋白I的猪动脉血管作为制备弹力蛋白肽的原料，不仅可降低成本，而且实现了资源的最大化利用；2）采用超声和红外线联用辅助酶解，不但可以大大缩短酶解时间，提高酶解效率，而且可显著提高弹力蛋白水解度和弹力蛋白肽的转化率；3）超滤后至少98%的弹力蛋白肽分子量小于10kDa，具有较好的品质和较高的利用价值；4）所得弹力蛋白肽可作为抗皱活性成分，按需要方便地直接添加到各剂型配方中，稳定性高、使用方便、功效显著，现将该酶解猪动脉血管制备弹力蛋白肽工艺及实施例介绍如下供研究交流参考：（311211  331247）

该项目由华炬新产品研究所技术咨询委员会多位专家根据目前国内该领域最新技术推荐的新技术、新产品、新工艺，
包括技术工艺、技术创新、技术配方、方法步骤及实例等方面的推荐，供同仁参考交流，
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