一种利用牛胆汁高效酶提取胆汁酸的方法

牛胆汁为牛科动物黄牛或水牛的胆汁，鲜胆汁色泽呈绿褐色或暗褐色微透明，略粘、腥臭、味苦等特点，是提取CA和DCA的主要原料之一。胆汁是一种多种成分的混合物，除有大量水份外，主要含有胆汁酸、胆色素、胆固醇、脂肪酸、卵磷脂、常量和微量元素以及维生素、氨基酸、无机盐离子等，与体液类似；此外，也含尿素、嘌呤等代谢产物和甲状腺素、性激素、免疫蛋白等。胆汁酸在胆汁中的含量占到50％～60％，是胆汁的主要成分之一。胆汁酸是胆汁中存在的一类胆烷酸的总称。胆汁酸根据结构的不同可分为游离胆汁酸和结合胆汁酸，游离胆汁酸包括胆酸(CA)、去氧胆酸(DCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)和石胆酸(LCA)；结合胆汁酸是上述胆汁酸分别与甘氨酸和牛磺酸相结合的产物，主要包括甘氨胆酸(GCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)。在动物体内90％以上的胆汁酸以结合形式存在，结合型胆汁酸是通过肽键与甘氨酸、牛磺酸结合而形成，如甘氨胆汁酸和牛磺胆汁酸，而牛磺胆汁酸是动物胆汁较为多见的胆汁酸，但是，在动物胆汁中游离型的胆汁酸含量极少或基本没有。目前，国内外一般从牛、羊、猪的胆汁中分离提取，主要有以下三种提取方法：乙醇结晶法、氯仿法、醋酸乙酯分离法；氯仿法、乙醇结晶法、醋酸乙酯分离法，但是，上述方法均有有毒物质(氯仿、醋酸乙酯)参与，并且为了降低杂质需用乙醇、强碱或强酸等致蛋白质变性，脂肪酸皂化等，试剂消耗量大、成本较高、收率低，纯度低，杂质含量仍然较高。如果采用微生物处理，由于胆汁酸在动物体内属于肠肝循环的原料，提取动物回肠及大肠内容物来培养提取其中的微生物，来水解结合型胆汁酸为游离型胆汁酸，不适合工业化生产，导致工艺繁琐，成本增加。因此，如何提供一种利用牛胆汁高效提取胆汁酸的方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

华炬新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项一种利用牛胆汁高效酶提取胆汁酸的方法，该技术提供了一种利用牛胆汁高效酶提取胆汁酸的方法。操作简便、条件温和、试剂消耗量较低，从牛胆汁中提取高纯度胆汁酸且收率高，适合大批量工业化生产。有益效果在于：步骤(1)使得牛胆汁中的蛋白质、胆固醇、卵磷脂等降解为小分子物质，便于后续分离提取；步骤(2)加入胆盐水解酶酶解使得牛胆汁中结合型胆汁酸为游离型胆汁酸，现将该一种利用牛胆汁高效酶提取胆汁酸的方法及实施例介绍如下供研究交流参考：（311241  361496） 

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