一种牛肉中肌红蛋白高效提取方法及步骤

在牛肉肌红蛋白提取纯化方法中，Tris-HCl法为常用的肌红蛋白粗提取方法，但现有肌红蛋白提取技术，存在着肌肉组织成分较为复杂，肌红蛋白难以快速稳定地沉淀；且(氧合)肌红蛋白本身易被氧化，不利于纯化后样品的保存应用等问题，需提升肌红蛋白提纯过程中的稳定性，减少肌红蛋白的氧化和变性损耗。

华炬科技新产品研究所技术咨询委员会科研人员现推荐一项一种牛肉中肌红蛋白高效提取方法及步骤，该技术通过优化步骤一中Tris-HCl混合缓冲液的pH值和提取时间、步骤二中肌红蛋白盐析液的饱和度，有效地提高了牛肉中肌红蛋白的提取量；该技术的Tris-HCl混合缓冲液中含有甘油和二硫苏糖醇，甘油在肌肉细胞浆内，形成了类脂膜结构，有效维持了肌红蛋白结构稳定性，更有利于其的快速沉淀析出，二硫苏糖醇避免了肌红蛋白部分敏感位点的氧化，保持了其还原性与生物活性，而后边搅拌边缓慢均匀缓慢均匀加入固体(NH4)2SO4进行盐析，能够实现分级沉淀，使盐析能有效提高肌红蛋白的纯度，4℃条件下沉淀蛋白质，能够防止温度升高导致肌红蛋白变性氧化，盐析后的透析可有效去除残留的(NH4)2SO4盐离子及其他小分子蛋白质，进一步提高肌红蛋白的纯度，最后进行凝胶过滤层析，将肌红蛋白有效的分离出来，而且不会破坏肌红蛋白的结构与功能，现将该一种牛肉中肌红蛋白高效提取方法及步骤及技术方案及实施例介绍如下供研究交流参考：（311241  321457）